转基因玉米多重PCR-基因芯片联用的检测方法

• 作者: 孙红炜 李宝笃 杨崇良 武海斌 路兴波
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 转基因玉米 转化体特异性检测 多重PCR Oligo探针
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1075-1082
• 页数: 8页
• 分类号: S188
• 字数: 6205字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.06.021

摘要

根据7种转基因玉米(Zea mays)Bt11、Bt176、Mon810、Mon863、TC1507、GA21和NK603的重组DNA结构分别设计转化体特异性引物,并对引物特异性及灵敏度进行验证.结果表明,所设计引物特异性强,灵敏度达0.1%,在此基础上以玉米内参照基因(ZSSIIb)作对照,对Bt11、Mon810、TC1507和GA21、NK603、Bt176分别作了2对四重PCR反应.根据插入外源基因与插入位点植物基因组DNA的特异结构,分别设计和筛选了7种转基因玉米转化体特异性Oligo探针,制备转基因玉米的寡核苷酸芯片.结果表明,所设计探针特异性强,灵敏度达0.01%.利用基因芯片检测方法结合多重PCR,建立并优化了1套三重PCR反应体系和两套四重PCR反应体系,可在1张芯片上同时有效地检测及鉴定多种转基因玉米,大大提高了检测的准确率和效率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李宝笃	青岛农业大学植物保护学院	49	234	8.0	12.0
2	路兴波	山东省农业科学院植物保护研究所	44	540	14.0	20.0
3	杨崇良	山东省农业科学院植物保护研究所	46	655	15.0	23.0
4	孙红炜	山东省农业科学院植物保护研究所	34	480	12.0	20.0
5	武海斌	山东省农业科学院植物保护研究所	5	68	5.0	5.0