转染T-bet基因的人胃癌SGC-7901细胞分泌IFN-γ的作用

• 作者: 杨敏 毛朝明 王胜军 王锁英 苏兆亮 许化溪 许小朋 邱谷风 邵启祥 马洁 黄新祥
• 来源期刊: 生物医学工程学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: T-bet基因 基因克隆 重组质粒 腺相关病毒载体 IFN-γ
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 606-609,619
• 页数: 5页
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文

摘要

采用基因克隆与腺相关病毒包装技术,构建人Th1细胞特异性转录因子T-bet 基因的腺相关病毒载体,并转染入胃癌细胞系SGC-7901细胞.检测转染细胞IFN-γ的分泌功能及其对SGC-7901细胞生物学作用的影响.结果:(1)获得含有T-bet基因的重组腺相关病毒(rAAV-eGFP-T-bet);(2)用rAAV-eGFP-T-bet感染SGC-7901细胞后,约30%～40%的细胞出现绿色荧光.对被感染细胞进行RT-PCR,扩增出1 670bp的T-bet,并经Western blot证实;(3)转染后的细胞测得388 bp的IFN-γ目的条带和IFN-γ蛋白的表达.由此表明,人T-bet基因的腺相关病毒载体rAAV-eGFP-T-bet,可成功转染SGC-7901,并致使转染细胞分泌IFN-γ.为进一步开展T-bet基因干预治疗肿瘤的研究奠定了基础.