双抗体夹心法检测3-硝基酪氨酸方法的建立及应用

• 作者: 刘慧荣 杨光照 武烨 王晓梁 田珏 许言午 闫莉 马秀瑞
• 来源期刊: 中国应用生理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 过氧亚硝基阴离子 硝基化酪氨酸 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 569-572
• 页数: 4页
• 分类号: R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的:建立一种准确、快速的双抗体夹心酶免疫吸附的方法,以定量检测组织中过氧亚硝基阴离子的水平.方法:分别以小鼠源性抗3-硝基酪氨酸单克隆IgG抗体和兔源性抗3-硝基酪氨酸IgG抗体为包被抗体和检测抗体,采用正交设计方法摸索以上各抗体的浓度,建立定量检测3-硝基酪氨酸(3-NT)的双抗体夹心ELISA法.同时,测定心肌缺血再灌注大鼠心肌组织3-NT的含量.结果:本研究建立的双抗体夹心ELISA法检测3-NT的最低检测下限为0.10 ng·ml-1,具有良好线性关系的检测范围是(0.15～7.50)ng·ml-1(r2=0.995);心肌缺血再灌注组大鼠的心肌组织中的3-NT水平为(1022.42±97.35)ng·mg pro-1,明显高于假手术组(246.58±56.52 ng·mg pro-1,P<0.01).结论:本研究建立的定量检测3-NT的双抗体夹心ELISA法能够方便、准确、快速地检测组织中3-NT的含量,为定量检测组织中ONOO-的水平提供了新的方法.