顶头孢霉原生质体制备、再生及带vgb基因的质粒DNA转化条件的研究

• 作者: 戴秀君 朱宝成 李术娜 李红亚 王全 马文婵
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 顶头孢霉 原生质体 制备 再生 转化
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 页码范围: 63-68
• 页数: 6页
• 分类号: Q939.97
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1573.2009.05.014

摘要

对头孢菌素C的工业生产菌种顶头孢霉(Cephalosporium acremonium)原生质体形成和再生条件进行了研究.优化后的制备及再生条件为:在蛋白胨固体培养基上培养110～120 h的菌丝体,30 ℃条件下经1%蜗牛酶和1%纤维素酶混合液酶解3.5 h,原生质体得率最高可达2.377×10~7 个/mL;在以KC(0 6 mol/L KCl+25 mmol/L CaCl_2·2H_2O)为渗透压稳定剂的再生培养基上进行培养,再生率可达40%.用pMK4-LV质粒通过电击法对原生质体进行转化,成功得到了重组子,转化率约为10 个转化子/μg质粒DNA.转化子的 PCR鉴定结果表明,外源基因已转入顶头孢霉基因组.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王全	河北农业大学生命科学学院	47	399	10.0	17.0
2	马文婵		14	45	4.0	5.0
3	李术娜	河北农业大学生命科学学院	112	1023	17.0	25.0
4	李红亚	河北农业大学生命科学学院	66	489	11.0	18.0
5	戴秀君		3	18	3.0	3.0
6	朱宝成		1	3	1.0	1.0