人BNIP3基因在Hela细胞中的表达及定位

• 作者: 刘芸 刘靖华 姜勇 王蔚 赵明哲 钟田雨 陈登宇
• 来源期刊: 贵阳医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 基因,bcl-2 Hela细胞 线粒体 荧光免疫测定 细胞内定位
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: R73-75|Q753
• 字数: 2574字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2707.2009.01.002

摘要

目的:构建BNIP3-HA融合蛋白的真核表达载体,观察BNIP3在Hela细胞中表达及其定位.方法:采用两步克隆法将HA和BNIP3的编码序列以融合表达的形式克隆到载体pcDNA3上,随后转染Hela细胞.BNIP3经AlexaFluor 488免疫荧光标记,线粒体用MitoFluor Red 589染色后在荧光显微镜下观察BNIP3的表达和定位.结果:重组质粒经酶切、聚合酶链反应(PCR) 和测序鉴定构建正确,并在Hela细胞中能够表达,在荧光显微镜下观察,BNIP3-HA融合蛋白分布于线粒体.结论:成功构建BNIP3-HA融合蛋白表达载体并在Hela细胞线粒体中表达.