可诱导共刺激分子与人IgG Fc融合蛋白诱导同种免疫低应答的体内外实验

• 作者: 张鹏 沈茜 王振猛 秦琴
• 来源期刊: 中华器官移植杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗原,CD28 免疫球蛋白G 重组融合蛋白质类 免疫抑制法 淋巴细胞培养试验,混合
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 389-393
• 页数: 5页
• 分类号: R6
• 字数: 3838字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2009.07.001

摘要

目的 探讨真核表达人可诱导共刺激分子(ICOS)与人IgG Fc融合蛋白(ICOS-Ig融合蛋白)在体内外对同种免疫应答的影响.方法 构建ICOS-Ig融合蛋白表达载体,在CHO细胞中表达并纯化ICXIS-Ig融合蛋白.以Balb/c小鼠脾细胞为反应细胞,经Co60照射灭活的(257BL/6小鼠脾细胞为刺激细胞,进行初次混合淋巴细胞反应(MLR),MLR体系中分别加入50μ,/ml IOOS-Ig融合蛋白(ICOS-Ig组)或对照IgG(IgG组),采用氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)掺入法检测反应细胞的增殖情况,酶联免疫吸附试验(ELSA)检测培养上清液中自细胞介素(IL)2、4、10以及γ干扰素(IFN-γ)的含量.收集初次MLR细胞,与灭活的C57BL/6小鼠脾细胞或C3H小鼠脾细胞共培养,进行再次MLR,检测指标同初次MLR.以Co60照射Balb/c小鼠,经尾静脉输注用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记的C57BL/6小鼠脾细胞,每天腹腔注射ICOS-Ig融合蛋白0.2 mg(IOOS-Ig组)、IgG(对照IgG组)或环孢素A(CsA组),3 d后取Balb/c小鼠脾细胞,流式细胞仪测定CFSE荧光强度以判断同种T淋巴细胞的体内增殖情况.结果 初次MLR显示,ICOS-Ig组同种T淋巴细胞活化增殖的抑制率为(58±8)%,其培养上清液中IFN-γ的水平明显高于IgG组(P<0.05).再次MLR显示,IOOS-Ig融合蛋白能特异性抑制C57BL/6小鼠脾细胞所致的细胞增殖,抑制率为(42±8)%,IL-4和Ⅱ-10的分泌受到抑制,而IFN-γ7的分泌增加;ICOS-Ig融合蛋白并不抑制第三方细胞所致的细胞增殖.体内实验显示,ICOS-Ig组和CsA组的CFSE荧光强度明显强于空白对照组和对照IgG组(P<0.05),而联合处理组CFSE荧光强度强于ICOS-Ig组和CsA组(P<0.05).结论 ICOS-Ig融合蛋白在体内外均可抑制同种T淋巴细胞的活化增殖,且这种作用具有特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈茜	第二军医大学附属长海医院检验科	184	1189	17.0	25.0
2	张鹏	第二军医大学附属长海医院检验科	51	291	10.0	15.0
3	秦琴	第二军医大学附属长海医院检验科	29	105	7.0	8.0
4	王振猛	第二军医大学附属东方肝胆外科医院麻醉科	15	90	6.0	9.0