T细胞可诱导共刺激分子配体胞外段基因的克隆与表达

• 作者: 康巧珍 汲翔 范丹丹 袁维堂 郭勋
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: T细胞可诱导共刺激分子 可诱导共刺激分子配体
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 233-236
• 页数: 4页
• 分类号: Q812
• 字数: 2873字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13705/j.issn.1671-6825.2019.08.167

摘要

目的:克隆T细胞可诱导共刺激分子配体胞外段(ICOSL-N)基因,构建pET22b-ICOSL-N-Ig原核表达载体,实现ICOSL-N与IgG4体外融合表达.方法:设计并合成T细胞ICOSL-N和IgG4基因特异性引物,RT-PCR法从小鼠脾脏中克隆出ICOSL-N,PCR重叠延伸技术将ICOSL-N与IgG4基因融合,构建原核表达载体pET22b-ICOSL-N-Ig,转化E.coli BL21(DE3)工程菌,筛选鉴定阳性克隆,IPTG诱导阳性重组子,SDS-PAGE法鉴定融合蛋白ICOSL-N-Ig的表达.结果:融合基因ICOSL-N-Ig的PCR扩增产物大小约1425 bp,符合理论值;原核表达载体pET22b-ICOSL-N-Ig经酶切、PCR和测序鉴定结果符合预期;在诱导后的菌体中检测出大小为53800的蛋白诱导条带,且与目标蛋白的大小一致.结论:成功克隆ICOSL-N基因,实现ICOSL-N在E.coli BL21(DE3)工程菌中与IgG4的融合表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁维堂	郑州大学第一附属医院肛肠外科	53	290	9.0	15.0
2	汲翔	郑州大学第一附属医院肛肠外科	5	3	1.0	1.0
3	康巧珍	郑州大学生命科学学院	32	117	7.0	9.0
4	郭勋	郑州大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
5	范丹丹	郑州大学河南省医药科学研究院肿瘤研究所	3	5	1.0	2.0