前列腺癌PSA特异性树突状细胞瘤苗的构建及其体外免疫活性的观察

• 作者: 任吉忠 刘玉杉 姚亚成 崔心刚 徐丹枫 车建平 邢继章 闵志廉 阴雷 高轶
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 树突细胞 前列腺特异抗原 前列腺癌 癌症疫苗 细胞毒性T淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 265-270
• 页数: 6页
• 分类号: R737.25
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1008.2009.00265

摘要

目的:构建前列腺癌PSA特异性树突状细胞(PSA-DC)瘤苗,并观察其体外免疫活性,为后续研究奠定基础.方法:分离骨髓前体细胞,大量制备骨髓DCs(bone marrow derived DC,BMDC);分别以PSA、癌细胞裂解产物(lysate,Lys)、无关蛋白卵清蛋白(Ova)冲击DC制备PSA-DC、Lys-DC、Ova-DC瘤苗.ELISA法检测PSA-DC瘤苗培养上清中细胞因子(IL-12 p70和IL-1β)水平的变化;观察PSA-DC瘤苗刺激抗原特异性T细胞增殖活性和诱导抗原特异性CTL杀伤活性,并与Lys-DC、Ova-DC瘤苗及未加入抗原冲击的DC(Non-DC)组作比较.结果:成功获得成熟DC,纯度可以达到>95%.ELISA法检测结果表明,PSA-DC、Lys-DC和Ova-DC组培养上清中IL-12 p70和IL-1β水平均较Non-DC组明显升高(P<0.05).混合淋巴细胞培养(MLR)显示:PSA-DC、Lys-DC组DCs刺激CD4+T细胞增殖的能力明显优于Ova-DC、Non-DC组(P<0.01);PSA-DC、Lys-DC组培养上清中IL-2、IFN-γ水平明显高于后两者(P<0.01),而IL-10和IL-4水平下调(P<0.05).PSA-DC、Lys-DC组可产生针对PSA和肿瘤裂解物的DTH反应,而对无关抗原无效(P<0.05).与OVA-DC、Non-DC组相比,Lys-DC、PSA-DC组体外诱导的CTL细胞对LNCaP细胞的杀伤活性较强 (P<0.05),且具有抗原特异性.结论:利用PSA蛋白冲击DC可成功制备PSA特异性DC瘤苗,该瘤苗体外具有较强的免疫活性,能有效杀伤LNCaP细胞.