非对称PCR-FP技术同步检测HSV-1/-2、CMV和EBV

• 作者: 吴中亮 张菊 李丁 李宏伟 梁平 王香玲 郭宴海 颜真
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人疱疹病毒 荧光偏振 非对称PCR 同步检测
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 分子诊断研究进展
• 页码范围: 405-407
• 页数: 3页
• 分类号: Q446.9
• 语种: 中文

摘要

目的 应用非对称PCR-荧光偏振(FP)技术建立一种同步检测全血中4种主要疱疹病毒(单纯疱疹病毒1/2型,巨细胞病毒、EB病毒)的新方法.方法 以人疱疹病毒属通用引物行非对称PCR,扩增从179例样本中抽提的DNA.PCR扩增产物与特异性单纯疱疹病毒1/2型(HSV-1/2)、巨细胞病毒(CMV)和EB病毒(EBV)寡核苷酸探针混合物温育杂交,荧光偏振检测技术检测杂交液荧光偏振值,据荧光偏振值判断病毒感染类型,并以DNA序列测定结果为参照.结果 与DNA序列测定的阳性检测符合率为100%,但DNA序列测定检测均未检出多重混合感染.非对称PCR-FP方法对HSV-1/-2检测的灵敏度达到1.0×10~3拷贝/ml,时EBV和cMV检测的灵敏度达到2.0×10~3拷贝/ml.结论 本法对于4种主要疱疹病毒感染的筛查及预防、预后判断具重要价值.