免疫捕捉real-time PCR对蚜虫中CMV检测体系的建立与应用

• 作者: 宋丽云 宋玉川 张长华 战徊旭 李锡宏 杨金广 王凤龙 申莉莉 钱玉梅
• 来源期刊: 中国烟草科学
• 关键词: 免疫捕捉real-time PCR 黄瓜花叶病毒(CMV) 蚜虫
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 页码范围: 105-109
• 页数: 5页
• 分类号: S572.08
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5119.2013.03.21

摘要

由黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus, CMV）引起的病毒病是烟草上最主要的病害之一，高虫口密度的带毒蚜虫的迁入是烟草上CMV病害发生的主要致病因子。本研究结合当前CMV的两个检测体系——ELISA和real-time RT-PCR，通过CMV抗血清与带毒蚜虫研磨液中的病毒粒体结合反应，病毒复合体粘附在PCR管壁上，然后直接进行反转录反应，随后进行real-time PCR检测，建立了免疫捕捉real-time RT-PCR（Immunocapture real-time RT-PCR）检测单头蚜虫体内CMV的实时定量检测技术，与普通real-time RT-PCR和ELISA相比，灵敏性和特异性显著提高。该方法无需RNA提取等步骤，可以有效地减少样品操作过程的污染和蛋白、多糖以及酚类物质等杂质的影响，能够对微量CMV病毒粒体进行准确、快速、特异和灵敏的定量检测，对烟草病毒病的预测预报、无毒种苗的生产和病害防治都具有重要的科学意义。