特异siRNA沉默人RPE细胞cx43基因的生物学变化

• 作者: 何守志 司艳芳 王凤翔
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 小干扰RNA 视网膜色素上皮细胞 缝隙连接蛋白43
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 677-680
• 页数: 4页
• 分类号: R774.1
• 字数: 4636字
• 语种: 中文

摘要

目的 通过RNA干扰的方法沉默缝隙连接蛋白43(connexin 43,cx43),观察cx43对人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞活动的影响.方法 培养原代的人RPE细胞,以不同浓度转染针对人cx43基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)特异片段,通过流式细胞仪观察其对细胞周期的影响;通过扫描电镜观察其对细胞形态的影响;采用激光共聚焦和荧光淬灭恢复技术观察荧光恢复速率平均百分率,评价其对细胞间通讯功能的影响;通过制作RPE细胞损伤模型,观察其对损伤修复能力的作用.结果 培养24 h和48 h,流式细胞仪检测S期RPE细胞比率,对照组分别为:(8.85±1.33)%和(15.52±2.60)%;100nmol·L-1、200 nmol·L-1、300 nmol·L-1siRNA1转染RPE细胞后,24 h、48 h S期细胞比率分别为:(10.64±2.50)%、(20.98±5.78)%,(19.42±2.88)%、(32.67±4.31)%,(20.31±4.03)%、(27.59±6.95)%,S期细胞比率明显增多,与对照组相比差异均有统计学意义(P均<0.05).细胞的扫描电镜显示转染siRNA后,细胞表型发生变化,细胞体积增大,表面触手增多.cx43基因被干扰后,细胞荧光恢复速率降低,细胞间通讯功能明显降低;细胞损伤修复能力下降.结论 cx43正常表达不仅影响细胞间通讯功能,且对细胞的生长周期、损伤修复多种细胞行为也起着重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何守志	解放军总医院眼科	72	456	11.0	18.0
2	王凤翔	解放军总医院眼科	19	65	4.0	8.0
3	司艳芳	解放军总医院第二附属医院眼科	16	46	4.0	6.0