一个phiC31相互作用的蛋白:人锌指蛋白403功能分析

• 作者: 张健琦 李文娟 王臻臻 田聆 薛京伦 陈金中
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: phiC31整合酶 锌指蛋白403 基因治疗 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2009,（37）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 7286-7290
• 页数: 5页
• 分类号: R349
• 字数: 4806字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.37.017

摘要

背景:phiC31是重要的基因治疗工具酶,其与细胞内蛋白的相互作用可能影响细胞内各种通路,从而关系到基因治疗的安全性.目的:构建锌指蛋白403基因原核表达载体,观察其在真核细胞的表达情况.设计、时间及地点:单一样本观察,于2007-10/2008-12在复旦大学遗传工程国家重点实验室完成.材料:大肠杆菌DH5a菌株及大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株均为实验室保存.方法:用pLexA-phiC31作为"诱饵",对人胎脑cDNA文库通过酵母双杂交进行筛查,分离阳性克隆.对锌指蛋白403基因构建原核表达载体并纯化鉴定.脂质体介导真核细胞进行转染并细胞定位观察.主要观察指标:锌指蛋白403的原核表达载体的构建、纯化及在真核细胞细胞质中定位的结果.结果:酵母双杂交进行筛查后分离61个阳性克隆中,有1个包含17号染色体17q12上的基因序列,其具有一个锌指结构,故名锌指蛋白403.成功构建了锌指蛋白403的原核表达载体,并纯化组氨酸标记的锌指蛋白403.在真核细胞中,构建了绿荧光融合载体,证明了此蛋白在细胞质中的定位.结论:实验结果发现了一个新的phiC31整合酶相互作用蛋白,成功构建了znf403基因的原核表达载体,znf403蛋白主要在细胞质中聚集和分布.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈金中	复旦大学生命科学院遗传所	20	29	3.0	4.0
2	田聆	复旦大学生命科学院遗传所	4	15	3.0	3.0
3	薛京伦	复旦大学生命科学院遗传所	51	228	8.0	13.0
4	李文娟	复旦大学生命科学院遗传所	12	21	3.0	4.0
5	张健琦	复旦大学生命科学院遗传所	1	3	1.0	1.0
6	王臻臻	复旦大学生命科学院遗传所	3	3	1.0	1.0