九种重要经济动物二级抗体的制备和HRP标记

• 作者: 刘先菊 张连峰 杨帆 林树柱 秦川
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 经济动物 IgG 兔 辣根过氧化酶
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 55-58,插5-插6
• 页数: 6页
• 分类号: R392
• 字数: 4155字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2009.06.013

摘要

目的 制备兔抗9种重要经济动物的二级抗体,并进行辣根过氧化酶标记,为经济动物血清学检测系统的建立提供工具.方法 利用饱和硫酸铵沉淀粗纯抗体后,再利用protein A或protein G 亲和层析的方法进一步纯化动物血清IgG,免疫大耳白兔制备抗血清,利用免疫双扩散来检测抗血清的效价,并用Protein A亲和层析的方法纯化兔抗经济动物的二级抗体,采用简易过碘酸钠法对纯化的二级抗体进行HRP标记,通过ELISA方法测定标记抗体的效价,并利用Western blotting考察标记抗体的特异性.结果 纯化了家猪,绵羊、山羊、牛、马、驴、狐狸、貉和黑貂9种重要经济动物的血清IgG,免疫双扩散法测定兔抗血清效价均达到1∶32,并对纯化的兔抗家猪,绵羊、山羊、牛、马、驴、狐狸、貉和黑貂9种重要经济动物二级抗体进行了HRP标记,ELISA测定标记抗体的效价达到1∶(2000～15000)左右,Western blots显示标记抗体具有很好的特异性.结论 成功制备了HRP标记的兔抗9种重要经济动物的二级抗体,为经济动物血清学检测体系的建立提供了工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林树柱	中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室	12	62	5.0	7.0
2	杨帆	中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室	26	142	7.0	10.0
3	刘先菊	中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室	17	55	5.0	6.0
4	秦川	中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室	84	504	11.0	19.0