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十七种哺乳动物二级抗体的制备和辣根过氧化物酶标记
十七种哺乳动物二级抗体的制备和辣根过氧化物酶标记
作者:
刘先菊
张连峰
杨帆
林树柱
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
哺乳动物
二级抗体
辣根过氧化物酶
标记
摘要:
目的 制备兔抗17种哺乳动物的二级抗体,并进行辣根过氧化物酶标记,为哺乳血清学检测系统的建立提供工具.方法 利用饱和硫酸铵沉淀法粗纯抗体后,再利用protein A或protein G亲和层析的方法进一步纯化哺乳动物的IgG,免疫大耳白兔制备抗血清,利用免疫双扩散来检测抗血清的效价,并用Protein A亲和层析的方法来纯化兔抗哺乳动物的二级抗体,采用简易过碘酸钠法对纯化的兔抗哺乳动物的二级抗体进行辣根过氧化物酶标记,通过ELlSA方法测定标记抗体的效价,并利用Western blot方法考察标记抗体的特异性.结果 纯化了恒河猴、东北虎、布氏田鼠、黑线姬鼠、斑羚、原驼、果子狸、食蟹猴、梅花鹿、长爪沙鼠、马鹿、骆驼、大仓鼠、豚鹿、熊猴、大耳羊和雪貂等17种哺乳动物的血清IgG,分别免疫大耳白兔制备了这17种哺乳动物的兔抗血清,免疫双扩散法测定兔抗这17种哺乳动物的抗血清效价均达到1:32,并对纯化的兔抗恒河猴IgG、兔抗东北虎IgG、兔抗布氏田鼠IgG、兔抗黑线姬鼠IgG、兔抗斑羚IgG、兔抗原驼IgG、兔抗果子狸IgG、兔抗食蟹猴IgG、兔抗梅花鹿IgG、兔抗长爪沙鼠IgG、兔抗马鹿IgG、兔抗骆驼IgG、兔抗大仓鼠IgG、兔抗豚鹿IgG、兔抗熊猴IgG、兔抗大耳羊IgG和兔抗雪貂IgG等17种哺乳动物的二级抗体进行了辣根过氧化物酶标记,ELISA测定标记抗体的效价达到1:(2000~60000)左右,Western blots显示标记抗体具有很好的特异性.结论 成功制备了HRP标记的兔抗17种哺乳动物的二级抗体,为哺乳动物血清学检测体系的建立提供了工具.
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文献信息
篇名
十七种哺乳动物二级抗体的制备和辣根过氧化物酶标记
来源期刊
中国比较医学杂志
学科
医学
关键词
哺乳动物
二级抗体
辣根过氧化物酶
标记
年,卷(期)
2011,(7)
所属期刊栏目
研究报告
研究方向
页码范围
1-5
页数
分类号
R392|R332
字数
4101字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1671.7856.2011.07.001
五维指标
作者信息
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哺乳动物
二级抗体
辣根过氧化物酶
标记
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
中国比较医学杂志
主办单位:
中国实验动物学会
中国医学科学院医学实验动物研究所
出版周期:
月刊
ISSN:
1671-7856
CN:
11-4822/R
开本:
16开
出版地:
北京市朝阳区潘家园南里5号
邮发代号:
创刊时间:
1991
语种:
chi
出版文献量(篇)
4463
总下载数(次)
15
总被引数(次)
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