人LIMK1基因荧光真核表达载体的构建及在人成骨肉瘤MG63细胞中的表达

• 作者: 王岩 赵建武 邢志军 高忠礼
• 来源期刊: 中国老年学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转染 LIMK1 MG63
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 176-177
• 页数: 2页
• 分类号: R738.1|R361+.3
• 字数: 1953字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9202.2009.02.020

摘要

目的 构建并表达人LIMK1与绿色荧光蛋白(EGFP-C1)的融合蛋白EGFP-LIMK1,并监测其在人成骨肉瘤MG63细胞内的表达及活性.方法 利用基因重组技术将LIMK1与绿色荧光蛋白融合并构建真核细胞表达质粒,通过脂质体介导法导人人成骨肉瘤MG63细胞内,用荧光显微镜观察LIMK1基因表达情况,通过Westernblot检测其在MG63细胞中的活性.结果 双酶切鉴定证实LIMK1片段已克隆到pEGFP-C1载体的Kpn Ⅰ和Not Ⅰ位点之间,测序结果证实了插入片段的正确性,转染MG63细胞后,利用荧光显微镜观察可见到绿色荧光蛋白的表达;Western blot检测证实LIMK1在MG63细胞中活性上调.结论 成功构建了含有绿色荧光蛋白基因的LIMK1真核表达载体并检测到其在真核细胞MG63中的表达及活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王岩	吉林大学病理生物学教育部重点实验室	133	735	15.0	21.0
2	高忠礼		146	636	12.0	15.0
3	赵建武		38	98	5.0	7.0
4	邢志军		3	4	2.0	2.0