PTEN基因真核表达载体的构建及在MG63中表达

• 作者: 徐生林 王京 王娟 王明明 胡勇 金问森
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: PTEN 分子克隆 真核表达 骨肉瘤 载体
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 789-792
• 分类号: R34|R349.52
• 字数: 3520字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2012.07.009

摘要

目的 构建PTEN基因真核表达载体,为PTEN基因功能研究提供工具.方法 从人淋巴细胞中提取总RNA,采用反转录-聚合酶链反应扩增PTEN基因编码区,将其克隆入pEGFP-N1载体中.通过聚合酶链反应、酶切和DNA测序鉴定所构建的载体.脂质体包裹重组载体转染骨肉瘤MG63细胞,RT-PCR和Western blot检测转染后的骨肉瘤MG63细胞中PTEN基因mRNA和蛋白质表达情况.结果 经过限制性酶切和测序鉴定得到重组子GFP-PTEN大小符合,序列与GenBank中人DNA的PTEN基因(NM_000314)完全一致.转染GFP-PTEN基因的骨肉瘤MG63细胞中PTEN基因mRNA和蛋白高水平表达.结论 成功地构建了PTEN基因真核表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡勇	安徽医科大学第一附属医院骨二科	89	513	11.0	19.0
2	金问森	安徽医科大学核医学教研室	22	84	5.0	8.0
3	王明明	安徽医科大学核医学教研室	35	103	6.0	7.0
4	王娟	安徽医科大学核医学教研室	65	183	7.0	8.0
5	徐生林	安徽医科大学第一附属医院骨二科	9	2	1.0	1.0
6	王京	安徽医科大学第一附属医院骨二科	2	1	1.0	1.0