纳米金新型基因芯片检测系统结合限制性酶切非PCR法同时检测多种病原性微生物的研究

• 作者: 周元国 梁冰 王华 顾大勇 鲁卫平
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 纳米金 寡核苷酸序列分析 病原微生物
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 511-514
• 页数: 4页
• 分类号: R446.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2009.05.007

摘要

目的 研究将纳米金新型基因芯片检测系统与限制性酶切非PCR法结合以实现同时对多种病原性微生物进行检测的方法.方法 以幽门螺杆菌、肺炎支原体、沙眼衣原体、白色念珠菌、解脲脲原体、EB病毒作为检测目标,选择Hha Ⅰ内切酶作为工具酶.对所有待检样本核酸进行Hha Ⅰ酶切,对酶切产物进行同聚A加尾处理,并结合纳米金新型芯片检测系统,分别与特异性探针及通用探针进行两次杂交以完成对目标微生物的检测.通过对168份临床样品的检测,考察新构建芯片的检测结果与荧光定量PCR检测结果的符合率;对构建芯片的稳定性及检测灵敏度进行测试.结果 新构建的基于限制性酶切非PCR法的纳米金芯片技术实现了对选定目标的检测.对168份临床样品的检测结果显示,该芯片检测与荧光定量PCR检测的结果有150例完全相符,符合率为89.2%;进一步芯片检测性能实验结果表明,该芯片检测稳定性为100%,检测敏感性为50pmol/L.结论 本研究构建的基于限制性酶切非PCR法的纳米金芯片技术可以同时实现对细菌、真菌、支原体、衣原体及病毒等微生物的检测.适用性广且对大幅度提高检测通量有积极意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周元国	第三军医大学大坪医院野战外科研究所7室	66	298	7.0	13.0
2	王华	第三军医大学大坪医院野战外科研究所7室	48	241	7.0	13.0
3	鲁卫平	第三军医大学大坪医院野战外科研究所7室	48	363	10.0	17.0
4	梁冰	解放军第401医院检验科	31	124	6.0	9.0
5	顾大勇	深圳出入境检验检疫局疾病预防控制研究室	14	82	5.0	8.0