鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的原核表达及生物学活性分析

• 作者: 张安云 张毅 樊汶樵 王红宁 谭兵
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 原核表达 生物学活性
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 725-729
• 页数: 5页
• 分类号: S852.4|Q78
• 字数: 3713字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2009.05.019

摘要

通过PCR方法扩增不含信号肽的鸡GM-CSF成熟蛋白基因,克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建原核表达质粒p32GM-CSF,通过IPTG诱导重组鸡GM-CSF蛋白表达,经镍离子亲和层析纯化后,用MTT法检测表达重组蛋白的生物学活性,并制备免抗鸡GM-CSF多克隆抗体.结果表明成功地构建了 p32GM-CSF原核表达质粒,SDS-PAGE结果显示表达的重组蛋白约34 ku,主要以包涵体形式表达,纯化后得到高纯度日的蛋白.Western Blot结果表明,该重组蛋白能与制备的抗鸡GM-CSF抗体特异性结合.MTT试验证实,该重组蛋白具有明显增强鸡骨髓细胞增殖的生物学活性;这些研究结果表明.表达的重组ehGM-CSF蛋白及其多克隆抗体拥有相应的生物学功能,这将为进一步研究鸡GM-CSF蛋白的生物学功能及其应用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭兵	四川农业大学动物医学院	4	20	2.0	4.0
2	樊汶樵	四川大学生命科学院四川大学"动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室	1	2	1.0	1.0