不同品种猪肠道拟杆菌属-普雷沃氏菌属群实时荧光定量分析

• 作者: 张丽萍 王康宁
• 来源期刊: 中国畜牧杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 拟杆菌属-普雷沃氏茵属 实时荧光定量PCR(FQ-PcR) TaqMan探针
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 动物生产
• 页码范围: 50-54
• 页数: 5页
• 分类号: S828.1
• 字数: 3884字
• 语种: 中文

摘要

对猪肠道30种细菌的16s rDNA序列进行比对分析,设计拟杆菌属-普雷沃氏茵属荧光定量的特异引物.以多形拟杆菌菌株(CDC1404-A)基因组的DNA为模板,以常规PCR引物扩增16s rDNA靶片断,将PCR产物纯化后作为DNA标准品,将梯度稀释的标准品作模板,建立定量标准曲线.以TaqMan探针建立25μL反应体系,对不同浓度的多形拟杆菌DNA样品进行检测,并以乳酸杆菌、大肠杆菌和双歧杆菌的基因组DNA模板作阴性对照.验证此方法检测拟杆菌属-普雷沃氏菌属的特异性.结果表明:设计的荧光定量引物和探针,仅对拟杆菌和普雷沃氏菌有很强的特异性,该方法的灵敏度可3.73个μL的基因组DNA.将PCR方法用于5月龄长白和太湖猪回肠内容物检测.其拟杆菌属-普雷沃氏菌属的检测结果呈阳性,每克回肠内容物拟杆菌属-普雷沃氏菌属数量的拷贝数对数值太湖猪比长白猪高38.5%(P<0.10),而且发现拟杆菌属-普雷沃氏茵属数量与背膘厚度、脂肪率之间有正相关关系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王康宁	四川农业大学动物营养所	161	1723	22.0	32.0
2	张丽萍	四川农业大学动物营养所	7	149	6.0	7.0