脂多糖结合蛋白/CD14结合位点的初步定位

• 作者: 冯起甲 吴国明 徐智 徐顺贵 李昆霖 李琦 王兴胜 钱桂生
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 脂多糖结合蛋白 CD14 噬菌体肽库 模拟肽 内毒素
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 565-568
• 页数: 4页
• 分类号: Q503|Q513|Q782
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2009.07.002

摘要

目的 应用噬菌体随机12肽库、DNAStar分析软件、亲和实验及竞争抑制实验初步定位脂多糖结合蛋白(1ipopolysaccharide binding protein,LBP)与CD14的结合位点.方法 以CD14为筛选分子,联合应用噬菌体肽库展示技术、噬菌体ELISA鉴定、LBP竞争抑制实验及DNA测序推导LBP/CD14结合位点的展示肽序列,采用DNAStar分析软件比对所获展示肽序列与LBP一级结构,初步定位LBP/CD14结合位点并人工合成其模拟肽.采用ELISA检测该模拟肽与CD14的亲和力及与LBP的竞争抑制活性.结果 DNAStar比对结果表明,经噬菌体肽库筛选获得的8条展示肽氨坫酸序列与LBP第252～263位氨基酸有一定相似性.LBP第252～263位氨基酸具有结合位点的特性,即有良好的亲水性、可及性、可塑性及抗原性,该部位可能是LBP/CD14的结合位点.体外活性实验表明,模拟肽FHRNHRSPVTLL可与CD14有良好的亲和力,有较强的与LBP竞争结合CD14的活性.结论 LBP第252～263位氨基酸的模拟肽FHRNHRSPVTLL与CD14有良好的亲和力及有较强的与LBP竞争结合CD14的活性,具有LBP/CD14结合位点的生物学特性,LBP/CD14结合位点初步定位在该区域.