重组载体pEGFP-N1/TNFR 1在人脐静脉血管内皮细胞中的表达

• 作者: 叶顺传 吕云波 吴辉文 曾秋棠
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 受体,肿瘤坏死因子 绿色荧光蛋白 脐静脉血管内皮细胞
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 1034-1037
• 页数: 4页
• 分类号: R363
• 字数: 4049字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2009.05.043

摘要

目的:构建肿瘤坏死因子受体1(TNFR 1)绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1/TNFR 1,并在人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)中表达.方法:分离并培养HUVECs,将已成功构建的融合表达载体pEGFP-N1/TNFR 1,通过阳离子脂质体Lipofectin介导的方法转染到HUVECs中,RT-PCR检测TNFR 1 mRNA的表达,Western blotting检测融合蛋白的瞬时表达,同时在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察.结果:成功分离HUVECs,重组pEGFP-N1/TNFR 1融合表达载体转染HUVECs后,在细胞中检测到TNFR 1基因片段,Western blotting可以检测到TNFR 1在HUVECs表达,用荧光显微镜观察到转染细胞中有绿色荧光蛋白表达.结论:重组pEGFP-N1/TNFR 1融合表达载体在HUVECs中获得了表达,融合蛋白具有TNFR 1和绿色荧光蛋白(GFP)的双重活性,为进一步研究TNFR 1转位的调控因素打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾秋棠	华中科技大学同济医学院协和医院心研所	255	1152	15.0	20.0
2	叶顺传	华中科技大学同济医学院协和医院心研所	9	10	2.0	2.0
3	吴辉文	华中科技大学同济医学院协和医院心研所	3	25	1.0	3.0
4	吕云波	华中科技大学同济医学院协和医院心研所	2	1	1.0	1.0