survivin启动子驱动的shRNA在宫颈癌SiHa细胞中的特异性表达

• 作者: 刘革力 卜友泉 宋方洲 易发平 杨正梅 程莉 袁成福 黄秀凝
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: survivin启动子 基因治疗 RNA干扰 宫颈癌
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 128-133
• 页数: 6页
• 分类号: R73
• 字数: 4829字
• 语种: 中文

摘要

研究survivin启动子驱动的小发夹RNA(shRNA)在宫颈癌SiHa细胞中的特异性表达.PCR扩增survivin启动子,构建以survivin启动子驱动增强绿色荧光蛋白(EGFP)表达的真核表达载体pEGFP-C1/Surv,并检测survivin启动子的活性;构建针对EGFP的shRNA真核表达载体pGenesil-1-EGFP-shRNA/U6,并检测shRNA在U6启动子驱动下的干扰效果;用有活性的survivin启动子取代pGenesil-1-EGFP-shRNA/U6载体中的U6启动子,从而获得新的shRNA真核表达载体pGenesil-1-EGFP-shRNA/Surv;将pGenesil-1-EGFP-shRNA/Surv转染到宫颈癌SiHa细胞及正常人脐静脉内皮HuVEC细胞,观察EGFP在两种细胞中的表达变化.结果表明,成功扩增survivin启动子并验证该启动子具有活性;成功构建EGFP shRNA真核表达载体pGenesil-1-EGFP-shRNA/U6,并验证shRNA在U6启动子驱动下具有较好的干扰效果;成功构建pGenesil-1-EGFP-shRNA/Surv载体,分别转染SiHa及HuVEC细胞,在SiHa 细胞中观察到较少的绿色荧光蛋白表达,而在HuVEC细胞中观察到较多的绿色荧光蛋白表达.survivin启动子能驱动shRNA在宫颈癌SiHa细胞中特异性表达,而在正常HuVEC细胞中不表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	易发平	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	45	167	7.0	10.0
2	杨正梅	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	9	14	3.0	3.0
3	刘革力	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	36	57	4.0	6.0
4	卜友泉	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	51	139	7.0	10.0
5	袁成福	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	14	15	2.0	3.0
6	程莉	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	13	7	2.0	2.0
7	黄秀凝	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	3	4	1.0	2.0