肿瘤特异性Survivin启动子驱动的FAK shRNA真核表达载体的构建

• 作者: 刘青光 周振宇 孙昊 宋涛 韩少山
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: Survivin启动子 FAK shRNA RNA干扰 肝癌
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 肿瘤学专题研究
• 页码范围: 533-538
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2012.05.002

摘要

目的 构建肿瘤特异性Survivin启动子驱动的FAK shRNA真核表达载体.方法 PCR扩增Survivin启动子,构建重组载体pGEMT/pSurv并酶切、测序鉴定.体外化学合成编码FAK shRNA寡核苷酸链并退火互补成双链,构建真核表达载体pGenesil-FAK shRNA并酶切、测序鉴定.用Survivin启动子替换pGenesil-FAK shRNA中的U6启动子,重组为Survivin启动子驱动的FAK shRNA真核表达载体pGenesil-pSurv-FAK shRNA.将pGenesil-pSurvFAK shRNA转染至肝癌细胞系HepG2,观察转染效率.48h后应用RT-PCR法检测转染重组质粒后HepG2细胞中FAK mRNA的表达变化.结果 成功构建了肿瘤特异性Survivin启动子驱动的真核表达载体pGenesil-pSur-FAKshRNA,转染至肝癌细胞HepG2后可明显下调HepG2细胞中FAK mRNA表达水平.结论 以Survivin启动子驱动的FAK shRNA真核表达载体能够有效下调肝癌细胞FAK的表达,为进一步以靶向干扰FAK表达为主要手段的肝癌联合治疗提供实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘青光	西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科	155	1133	18.0	22.0
2	宋涛	西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科	91	380	12.0	17.0
3	孙昊	西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科	40	342	10.0	17.0
4	韩少山	西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科	19	54	5.0	6.0
5	周振宇	西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科	5	66	4.0	5.0