His肽修饰人干扰素γ制备

• 作者: 徐靖 胡大强 陈亮
• 来源期刊: 中国药师
• 学科: 生物学
• 关键词: 人干扰素γ 表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1351-1353
• 页数: 3页
• 分类号: Q503
• 字数: 2713字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-049X.2009.10.007

摘要

目的:为便于人干扰素γ功能研究,制备6His修饰的人干扰素γ.方法:采用一步反向PCR扩增编码人干扰素γ的cDNA序列,克隆到质粒pUC19,测序鉴定正确后构建于pQE80L表达质粒,BamHⅠ和HindⅢ双酶切,行1.2%琼脂糖凝胶电泳鉴定;SDS-PAGE和Western blot检测表达的目的蛋白,Ni2+-NTA柱纯化蛋白,酶联免疫吸附测定纯化的目的蛋白.结果:一步反向PCR扩增得到编码人干扰素γ cDNA片段,测序结果正确,SDS-PAGE和Western blot分析显示His修饰的人干扰素γ在大肠杆茵中获得了高效表达,SDS-PAGE证实目的蛋白具有较高纯度,酶联免疫吸附测定出目的蛋白.结论:本法成功制备了6His肽修饰的人干扰素γ.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈亮	第三军医大学第三附属医院药剂科	101	593	10.0	19.0
2	胡大强	第三军医大学第三附属医院药剂科	35	162	6.0	10.0
3	徐靖	第三军医大学第三附属医院药剂科	6	20	3.0	4.0