人甲状旁腺激素(1-34)二联体与人血清白蛋白融合蛋白的构建及表达

• 作者: 张梅 邬敏辰 金坚
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: 人甲状旁腺激素(1-34)二联体 人血清白蛋白 融合蛋白 构建及表达
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 117-121
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3936字
• 语种: 中文

摘要

构建人甲状旁腺激素(1-34)二联体与人血清白蛋白融合蛋白的表达载体,并表达得到该融合蛋白.通过设计强特异性的引物,利用重叠PCR技术,定向定量的拼接得到hPTH(1-34)二联体-HSA融合蛋白的基因;将构建好的融合基因插入表达载体pPIC9K,大量扩增重组质粒,并用Sal I线性化,电击转化毕赤酵母GS115,经组氨酸缺陷和G418抗性双重筛选得到阳性转化子;挑选阳性转化子进行甲醇诱导表达.测序结果表明得到的重组质粒pPIC9K-hPTH(1-34)二联体-HSA与目标设计完全一致;基因组PCR鉴定结果证明成功构建了hPTH(1-34)二联体-HSA融合基因的毕赤酵母(GS115)表达系统;SDS-PAGE电泳表明融合蛋白获得了表达,尿微量白蛋白试剂盒测定甲醇诱导表达3d后融合蛋白的产量为127 mg/L.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金坚	江南大学医药学院	196	1025	16.0	22.0
2	邬敏辰	江南大学医药学院	163	1504	22.0	29.0
3	张梅	江南大学医药学院	3	14	2.0	3.0