人白介素-2/人血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的表达

• 作者: 张莲芬 李华钟 段作营 郭泽峰 金坚
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人白介素-2 人血清白蛋白 毕赤酵母 融合蛋白 表达
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 82-86
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3321字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2008.01.020

摘要

目的:构建编码人白介素-2/人血清白蛋白的重组表达质粒pPIH,在毕赤酵母(Pichia pastria)中进行表达,获得具有白介素-2(IL-2)活性的融合蛋白.方法:通过逆转录方法从人外周血单核细胞得到人IL-2的cDNA,再通过重叠PCR方法,将编码人IL-2的cDNA和编码人白蛋白的cDNA拼接起来,克隆至T载体获得含有融合基因IH的质粒pMD19/IH.用Eco RI和NotI 双酶切pMD19/IH和pPIC9K两种质粒,通过琼脂糖凝胶电泳分离,试剂盒纯化,将IH片段和pPIC9K连接获得表达型pPIH的重组质粒,利用电转化方法转化毕赤酵母KM71获得重组表达质粒pPIH;CTLL-2/MTT法测定融合蛋白中人IL-2活性.结果:成功构建了人白介素-2/人血清白蛋白的重组表达质粒pPIH,融合蛋白得到了较理想的表达;重组菌经甲醇诱导表达后含有融合蛋白IL-2-HSA发酵上清液表现100 U/mL的生物学活性.结论:成功获得具有人IL-2生物活性的重组人白介素-2/血清白蛋白融合蛋白,该研究结果未见文献报道.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张莲芬	江南大学医药学院	32	395	12.0	19.0
2	金坚	江南大学医药学院	196	1025	16.0	22.0
3	段作营	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	84	674	14.0	21.0
4	李华钟	江南大学医药学院	63	592	13.0	22.0
8	郭泽峰	江南大学医药学院	1	9	1.0	1.0