重组人血清白蛋白第3结构域-Nartograstim融合蛋白在毕赤酵母中的表达及初步活性研究

• 作者: 刘超 张瑜 田浤 赵述强 高向东
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人血清白蛋白 粒细胞集落刺激因子 3DHSA 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 577-582
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 3524字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20130618

摘要

将人血清白蛋白第3结构域(3DHSA)与粒细胞集落刺激因子突变体(Nartograstim)融合基因克隆至载体pPICzαA,置于醇氧化酶启动子(AOX)和α交配因子信号肽作用下构建分泌表达质粒,电击转化入毕赤酵母GS115.SDS-PAGE结果显示3DHSA-Nartograstim相对分子质量约为42 kD,Western blot证实其同时具有HSA和G-CSF的抗原性.建立融合蛋白表达的条件为:BMMY培养基pH6.0、1.5％甲醇、诱导84 h,灰度扫描发现该条件下融合蛋白的纯度为79％.依次采用亲和色谱和疏水色谱纯化得到纯度高于90％的融合蛋白,终产量为86 mg/L.采用MTT法检测融合蛋白对NFS-60细胞株的促增殖能力,结果显示,3DHSA-Nartograstim具有剂量依赖性促进NFS-60细胞增殖的作用.本研究为3DHSA-Nartograstim的进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张瑜	中国药科大学生命科学与技术学院	11	26	3.0	5.0
2	高向东	中国药科大学生命科学与技术学院	188	1604	21.0	30.0
3	田浤	中国药科大学生命科学与技术学院	35	69	6.0	7.0
4	赵述强	中国药科大学生命科学与技术学院	1	1	1.0	1.0
5	刘超	中国药科大学生命科学与技术学院	4	5	1.0	1.0