狂犬病病毒糖蛋白在毕赤酵母GS115中的表达及产物特性研究

• 作者: 刘国强 刘晔 张乐萃 张守峰 扈荣良 王玉莹 袁颖烁 连海
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 狂犬病病毒糖蛋白 毕赤酵母 反应原性
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 22-24
• 页数: 3页
• 分类号: S852.65+5
• 语种: 中文

摘要

本试验旨在利用毕赤酵母系统表达狂犬病病毒(Rv)糖蛋白(GP)基因,并对重组蛋白进行反应原性研究.构建重组表达质粒pPiczαA-G,线性化后电转入酵母GS115中,经平板初筛及PCR鉴定正确后命名为pPiczαA-G-GS115.重组菌经1.0％甲醇诱导表达,对目的蛋白进行双抗体夹心ELISA检测、SDS-PAGE电泳、Western blot分析.结果表明,ELISA检测诱导72h重组蛋白表达量最高;SDS-PAGE分析显示目的蛋白相对分子量约为65 kD,与理论值相符.Western blot结果表明,重组蛋白可与RV阳性血清发生特异性反应.本试验为进一步研制狂犬病病毒ELISA抗体诊断试剂盒奠定基础.