重组毕赤酵母表达人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白过程的代谢特性

• 作者: 刘立明 史仲平 李华钟 王舒 詹晓北 郑志永 金坚 高敏杰
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 学科: 工学
• 关键词: 重组甲醇营养型毕赤酵母 在线测量 酶活分析 相关性分析
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 11-17
• 页数: 7页
• 分类号: TS2
• 字数: 6194字
• 语种: 中文

摘要

分析了重组甲醇营养型毕赤酵母在5 L多参数自控发酵罐上生产人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白(HSA-IL-2)的发酵过程.在使用多种在线传感器和离线检测参数的基础上,应用相关性分析的方法将细胞生长的关键酶(乙醇氧化酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶)酶活和代谢特性相关联.实验结果显示,甲醇诱导后葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶的酶活分别下降了46.1%和66.8%,说明胞内代谢流发生了迁移:三羧酸循环(TCA)和磷酸戊糖途径(HMP)中代谢流通量下降,甲醇完全氧化代谢成为主要代谢流.此外,在不同控制策略下,乙醇氧化酶的酶活和重组蛋白HSA-IL-2表达量也呈现出一定的差异.高溶氧低甲醇控制方式下HSA-IL2的表达量达到27 mg/L,比低溶氧高甲醇条件下的表达量高33.7%.