鸡肉中氟苯尼考ELISA检测方法的建立及应用

• 作者: 刁有祥 孙宁 孙法良 纪巍 马艳芳
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 氟苯尼考 残留检测 间接竞争ELISA
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 兽医
• 页码范围: 1813-1819
• 页数: 7页
• 分类号: S8
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.05.039

摘要

[目的]制备抗氟苯尼考(FFC)的高亲和力特异性抗体,建立检测氟苯尼考的间接竞争ELISA新方法.[方法]氟苯尼考分别与生血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HAS)经混合酸酐法偶联,得到免疫抗原和包被抗原,其偶联比分别为14.4和14.7.用免疫原FFC-HS-BSA免疫新西兰大白兔获得了效价较高的特异性抗体.建立并优化了间接竞争ELISA检测方法.[结果]抗血清效价为1:102 400.最佳包被抗原浓度为0.5μ·ml-1,最佳抗体工作浓度为1:6 400,酶标二抗的工作浓度为1:20 000.回归方程,Y=-0.1516X+0.788(R2=0.9859),检测范围为0.18～500 ng·ml-1,检出限为0.18 ng·ml-1,批内和批间平均变异系数分别为4.86%和7.77%.交叉反应试验中,抗血清与FFC结构相似的氯霉素和甲砜霉素交叉反应率分别为0.094%和0.098%,与其它药物交叉反应率均小于0.01%,表明该方法具有很强的特异性.FFC以浓度0.18～500 ng·g-1在鸡肉中添加,回收率为84.14%～106.1%,变异系数为2.1%～5.6%.[结论]成功获得了高效价、高特异性的抗FFC抗体,建立了鸡肉中氟苯尼考残留检测的ELISA方法.结果表明,所建立的检测方法具有灵敏、准确、简便、快速的特点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刁有祥	山东农业大学动物科技学院	182	1328	18.0	28.0
2	马艳芳	山东农业大学动物科技学院	24	122	7.0	8.0
3	纪巍	山东农业大学动物科技学院	8	40	5.0	6.0
4	孙法良	山东农业大学动物科技学院	7	37	5.0	6.0
5	孙宁	山东农业大学动物科技学院	13	44	5.0	6.0