冻存复苏人脐带间充质干细胞体外扩增和向脂肪细胞分化的研究

• 作者: 刘毅 肖宏涛 陈克明
• 来源期刊: 中国美容医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 冻存 脐带 间充质干细胞 分化 脂肪细胞
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 484-486
• 页数: 3页
• 分类号: Q813.1
• 字数: 2826字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-6455.2009.04.022

摘要

目的:分离培养人脐带间充质干细胞(human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells hUCMSCs),观察其冻存复苏后向脂肪细胞定向分化的能力.方法:将剔除动静脉的新鲜人脐带组织切成小块培养,得到贴壁细胞,观察细胞生长及检测其表面抗原.将第1代的hUCMSCs采用梯度冷冻技术冻存5个月,复苏后培养至第12代时,加入成脂诱导剂培养.当诱导至21天时行油红0染色,7天及14天时用RT-PCR技术分别检测成脂转化基因过氧化物酶增殖剂受体(PPARγ-2)和脂蛋白酯酶(LPL).结果:组织块培养法收获的单个核细胞培养传代后,能获得均一贴壁的问充质干细胞,hUCMSCs冻存复苏后,活细胞约为86%,流式细胞仪分析这些细胞表达CD13、CD44和CD71等MSCs标志物,不表达CD14、CD34和HLA-DR表面抗原.复苏细胞在成脂诱导剂的作用下,细胞中有脂滴产生,通过油红0染色显示细胞核周围有脂滴聚集,通过RT-PCR检测有LPL及PPARγ2mRNA的表达.结论:采用组织块贴壁培养法分离获得的人脐带间充质干细胞可冷冻保存.复苏后培养至第12代仍具有向脂肪细胞分化的潜能,可作为脂肪组织工程种子细胞来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘毅	兰州军区兰州总医院烧伤整形科	324	1478	16.0	21.0
2	陈克明	兰州军区兰州总医院创伤外科研究所	210	1887	22.0	34.0
3	肖宏涛	兰州军区兰州总医院烧伤整形科	4	16	2.0	4.0