特异性siRNA抑制宫颈癌细胞中HPV16 E7基因的表达

• 作者: 刘文康 姜向阳 张镇西 楚雍烈 薛翔
• 来源期刊: 现代肿瘤医学
• 学科: 医学
• 关键词: HPV16 CaSKi细胞 E7基因 RNAi
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 824-827
• 页数: 4页
• 分类号: R73-36+2|R737.33
• 字数: 3672字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4992.2009.05.010

摘要

目的:用真核表达siRNA干扰技术特异性抑制宫颈癌细胞CaSKi中HPV16 E7癌基因的表达.方法:运用DNA重组技术构建表达特异性siRNA的 pGenesil-1/E7(PS7)重组质粒,用脂质体分别将重组质粒转染宫颈癌细胞系CaSKi细胞内,通过半定量RT-PCR 实验检测CaSKi/PS7细胞中E7 mRNA水平的变化;再用western blotting检测 CaSKi/PS7细胞中E7蛋白、磷酸化pRb 和去磷酸化Rb的表达;用免疫细胞化学法检测细胞中ki-67、NF-κB 、bcl-2和p16的表达.结果:成功构建了真核细胞表达的、特异性siRNA的PSN 和PS7重组质粒.在RNA干扰24、48和72小时后 CaSKi/PS7细胞中E7 mRNA分别下降了21.05%、 51.80%和49.10%;RNA干扰后的CaSKi/PS7细胞中E7蛋白的表达逐渐减低,而且磷酸化pRb表达降低和去磷酸化Rb 的表达升高;与CaSKi/PSN细胞相比,CaSKi/PS7细胞中的ki-67、NF-κB 和bcl-2表达降低,而p16的表达增加.结论:本研究成功构建了真核细胞体内表达特异性siRNA重组体,有效地抑制了宫颈癌细胞CaSKi中HPV16 E7基因的表达,为RNA干扰应用于研究宫颈癌发病分子机制提供了新的资料和方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	楚雍烈	西安交通大学医学院	76	311	10.0	13.0
2	姜向阳	西安交通大学医学院	2	1	1.0	1.0