人白细胞介素-12的纯化及鉴定

• 作者: 罗果 葛正龙 黄进
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 人白细胞介素-12 纯化 转基因马铃薯
• 年，卷（期）: 2009,（14）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 6353-6355
• 页数: 3页
• 分类号: S188
• 字数: 3539字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2009.14.018

摘要

[目的]利用人白细胞介素-12(human interleukin 12,hIL-12)转基因马铃薯,探讨hIL-12的纯化条件.[方法]提取转基因马铃薯中的总蛋白,hIL-12的分离纯化步骤包括超滤、MKF-AIW阴离子交换层析、MKF-CIC阳离子交换层析.在阴离子交换层析吸附过程中采用试管法选择最佳吸附pH值,选择洗脱过程最佳洗脱pH值;选择阳离子交换层析洗脱过程最佳洗脱pH值;ELISA法测定各纯化阶段收集的上清液或洗脱峰中的hIL-12的含量;非还原SDS-PAGE电泳鉴定蛋白纯度;Western Blot检测纯化的hIL-12.[结果]阴离子交换层析吸附过程最佳吸附pH值为7.5,洗脱过程最佳洗脱pH值为7,阳离子交换层析洗脱过程最佳洗脱pH值为6.5.纯化的hIL-12经非还原SDS-PAGE分析蛋白纯度为91%.Western Blot分析结果表明,在40 kD处有特异的蛋白条带出现.[结论]hIL-12转基因马铃薯经总蛋白提取,超滤,阴离子交换层析,阳离子交换层析纯化,获得了高纯度的hIL-12.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	葛正龙	遵义医学院生物化学教研室	78	273	9.0	11.0
2	罗果	遵义医学院中心实验室	25	77	5.0	7.0
3	黄进	遵义医学院珠海校区生物工程系	4	14	2.0	3.0