拯救新城疫病毒LaSota株辅助质粒的构建

• 作者: 康震 张乐萃 张守峰 房丽君 扈荣良
• 来源期刊: 青岛农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒LaSota株 反向遗传操作 辅助质粒
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医
• 页码范围: 139-143
• 分类号: S852.65Q782
• 字数: 2498字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.1674-148X.2010.02.011

摘要

本实验室保存的LaSota株新城疫病毒经SPF鸡胚增殖,收集尿囊液并纯化病毒,提取病毒基因组RNA.参考GeneBank收录的LaSota株新城疫病毒基因组序列,设计6对特异性引物,分别扩增病毒的NP、P和L1～L4 六个基因片段,并将目的片段回收纯化,克隆至pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,小提质粒并酶切鉴定,鉴定正确的样品进行序列测定,并比对测序结果.结果证明测序结果与GeneBank上公布的LaSota株新城疫病毒序列完全一致,没有任何氨基酸和核苷酸的变化,将NP、P、L分别连接至pVAX载体,其中L1～L4为顺次连接.鉴定结果表明NP、P和L基因已正确克隆至pVAX表达载体,证明3个辅助质粒构建成功,分别命名为pVAX-NP、pVAX-P 和pVAX-L.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张守峰	军事医学科学院军事兽医研究所	65	311	9.0	13.0
2	扈荣良	军事医学科学院军事兽医研究所	92	445	11.0	15.0
3	张乐萃	青岛农业大学动物科技学院	22	43	4.0	6.0
4	房丽君	军事医学科学院军事兽医研究所	2	4	1.0	2.0
8	康震	青岛农业大学动物科技学院	1	0	0.0	0.0