新城疫病毒LaSota株NP、P和L基因表达载体的构建及真核表达

• 作者: 刘垒 呙会会 周祖涛 李筱雯 王贵强 肖运才 金卉
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒 NP P和L基因 辅助质粒
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659
• 字数: 3617字
• 语种: 中文

摘要

为研究新城疫病毒NP、P和L蛋白作用机理和新城疫病毒反向遗传操作系统，构建新城疫病毒LaSota株NP、P和L基因的真核表达载体。根据GenBank中新城疫LaSota株的全长序列（JF950510．1），设计4对特异性引物，用RT-PCR法扩增出新城疫病毒LaSota株的NP、P和L基因，将其克隆到真核载体pCl-neo上。通过酶切和测序验证克隆正确，得到重组质粒pCl-NP、pCl-P和pCl-L，瞬时转染到BHK-21细胞中。经RT-PCR、Westernblot、间接免疫荧光试验分别检测NP、P和L蛋白在BHK-21细胞中的表达。经上述三种方法分别检测到NP、P和L蛋白在BHK-21细胞中的表达。重组质粒pCl-NP、pCl-P和pCl-L构建成功，为后期新城疫病毒反向遗传操作系统的构建奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周祖涛	华中农业大学动物医学院	9	10	2.0	2.0
2	肖运才	华中农业大学动物医学院	20	145	6.0	11.0
3	王贵强		8	16	2.0	3.0
4	金卉	华中农业大学动物医学院	2	4	2.0	2.0
5	刘垒	华中农业大学动物医学院	4	10	2.0	3.0
6	呙会会	华中农业大学动物医学院	2	3	1.0	1.0
7	李筱雯	华中农业大学动物医学院	2	2	1.0	1.0