新城疫病毒F48 E9株M和NP基因的原核表达

• 作者: 刘培欣 刘春国 吴芬芳 孔宪刚 曹殿军 闫丽辉 闻晓波
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒 M基因 NP基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 181-185
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 4633字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2008.03.001

摘要

根据新城疫病毒(NDV)F48E9国内标准强毒株编码序列设计了2对特异性引物,分别用于扩增M和NP基因.经序列测定,将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,转化E.coli BL21(DE3),筛选表达NDV F48E9株M蛋白和NP蛋白的菌株.IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析结果表明,NDV M蛋白在E.coli BL21(DE3)内以可溶形式存在,而NP蛋白以包涵体的形式表达.用纯化的M和NP蛋白免疫鸡制备超免疫血清,进行Western-blot分析;结果,它们可以与真核表达系统表达的M和NP蛋白以及NDV发生特异性反应,表明,原核表达系统表达的NDV M和NP蛋白具有良好的免疫原性和反应原性.