鸭新城疫病毒 NP 基因的原核表达与多抗的制备

• 作者: 吴双 左伟勇 朱善元 洪伟鸣 王安平 王永娟
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭新城疫病毒 NP 基因 原核表达 多抗
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 554-557
• 页数: 4页
• 分类号: S852
• 字数: 3032字
• 语种: 中文

摘要

根据鸭新城疫病毒 NP 基因序列设计1对特异性引物，RT-PCR 方法扩增出 NP 基因，克隆入原核表达载体 pET-30a，转化大肠杆菌感受态细胞 BL21（DE3），在 IPTG 的诱导下融合蛋白获得了成功表达，SDS-PAGE 结果显示表达的融合蛋白分子量约为59 kD，Western blotting 分析表明该重组融合蛋白能与 His 组氨酸单抗发生特异性反应。将目的蛋白切胶免疫 ICR 小鼠，制备了针对重组蛋白的多抗血清，Western-blotting 分析显示制备的多抗血清能够与鸭新城疫病毒感染的 SPF 鸡胚尿囊液总蛋白发生特异反应。以上结果表明，NP 基因在大肠杆菌中获得了成功表达，且制备的多抗血清可以用于 NP 蛋白的检测。