天然溶瘤新城疫病毒Italien株HN基因真核表达载体的构建和表达

• 作者: 尉丁 张华 李亚琳 杨滨 边惠洁 陈志南
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 新城疫病毒 血凝素-神经氨酸酶基因 转染 基因表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 100-103
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3913字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2007.02.005

摘要

目的 构建天然溶瘤型新城疫病毒(NDV)Italien株血凝素-神经氨酸酶(HN)基因的真核表达载体并进行产物表达.方法 采用RT-PCR法从病毒RNA中克隆HN cDNA,并构建HN的真核表达载体pcDNA3.1-HN,脂质体法转染CHO-K1,G418筛选稳定表达克隆.用Western blot、免疫荧光法检测HN蛋白的表达.结果 经限制性酶切鉴定及DNA测序分析,证实真核表达载体pcDNA3.1-HN构建正确.Western blot和免疫荧光分析表明HN基因在CHO-K1中成功表达.结论 天然溶瘤型NDV Italien株的HN cDNA被成功克隆,所构建的真核表达载体pcDNA3.1-HN可以在CHO-K1细胞中稳定表达.