表达新城疫病毒血凝素神经氨酸酶(HN)基因重组鸭肠炎病毒的构建

• 作者: 刘胜旺 李慧昕 梁殊林 陈洪岩
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 鸭肠炎病毒(DEV) 新城疫病毒(NDV) 血凝素神经氨酸酶(HN)基因 重组病毒 基因修饰
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 195-201
• 页数: 7页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 3791字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2015.03.004

摘要

目的 构建表达新城疫病毒血凝素神经氨酸酶(HN)基因的重组鸭肠炎病毒(DEV).方法 利用同源重组技术,在DEV Clone-03基因组中胸苷激酶(TK)基因内部插入新城疫病毒HN基因.以本实验室已构建的rDEV TK-EGFP株为亲本病毒,将病毒基因组与转移载体共转染及蚀斑纯化,获得表达新城疫病毒HN基因的重组鸭肠炎病毒.结果 重组病毒经基因水平和蛋白水平的鉴定,证明新城疫病毒HN基因正确插入DEV基因组内部且有效表达;复制动力学和遗传稳定性检测,证明重组病毒rDEV TK-HN滴度略有下降,但复制趋势与亲本病毒一致;在鸡胚成纤维细胞(CEF)和SPF鸡胚连续传代20代,表明HN基因随病毒传代而稳定遗传、表达.结论 利用同源重组技术,对鸭肠炎病毒基因组进行修饰,构建了TK基因缺失表达新城疫病毒HN基因的重组鸭肠炎病毒,该病毒能够携带HN基因稳定遗传和表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈洪岩	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心	47	241	8.0	14.0
2	梁殊林	东北农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0