猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白在毕赤酵母中的分泌表达

• 作者: 姜世金 康雪燕 张培君 张莉
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪传染性胃肠炎病毒 纤突糖蛋白 巴斯德毕赤酵母 分泌表达
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 222-226
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4204字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.02.018

摘要

目的:利用巴斯德毕赤酵母表达系统表达猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)纤突糖蛋白S.方法:根据GenBank中猪TGEV纤突耱蛋白S全基因设计一对引物,并在5'引物和3'引物中引入EcoR Ⅰ、Not Ⅰ酶切位点,2.2 kb的目的基因S经PCR扩增后克隆于pBS-T载体,再将S基因经双酶切从T载体切下并与穿梭质粒pPIC9k连接,Sal Ⅰ线性化重组穿梭质粒pPIC9k-S,电转化于毕赤酵母GS115感受态细胞,G418筛选鉴定阳性重组子,经甲醇诱导,SDSPAGE检测诱导后上清.结果:对pPIC9k-S重组酵母表达载体的测序证实巳成功克隆了猪TGEV S基因;重组酵母菌诱导表达后,SDS-PAGE检测结果显示表达产物的相对分子质量的为82×103,且S蛋白以可溶性形式分泌表达于胞外.结论:利用巴斯德毕赤酵母真核表达系统成功表达了猪传染性胃肠炎病毒(河北分离株)纤突糖蛋白S.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张莉	北京市农林科学院畜牧兽医研究所	58	245	9.0	12.0
2	姜世金	山东农业大学动物医学院	90	1341	19.0	33.0
3	张培君	北京市农林科学院畜牧兽医研究所	71	592	13.0	20.0
4	康雪燕	山东农业大学动物医学院	1	1	1.0	1.0