一种适用于RT-PCR的微藻总RNA提取方法

• 作者: 孔健 张可炜 杨婧 牛艳
• 来源期刊: 海洋科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 绿色巴夫藻(Pavlova viridis) 多糖 多酚 总RNA 反转录聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 实验与技术
• 页码范围: 6-10,47
• 页数: 6页
• 分类号: Q78|Q178.53
• 语种: 中文

摘要

以绿色巴夫藻(Pavlova viridis)为实验材料,在比较了Trizol试剂法和异硫氰酸胍一步法这两种常用RNA提取方法的基础上,建立了一种十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)和酸酚相结合的改良的CTAB-酸酚法.此方法利用高浓度的β-巯基乙醇来防止RNA提取过程中多酚的氧化,然后利用CTAB并结合乙醇和醋酸钾同时使用的方法来有效去除多糖类物质对RNA的干扰.经琼脂糖凝胶电泳检测,所提取的总RNA的28S、18S条带清晰明亮,无降解;其A260 nm/A280 nm值为1.968;200～300 nm全波长紫外扫描无多糖和蛋白吸收峰,表明提取的总RNA质量较好.对提取的总RNA直接进行反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-RCR),能够清楚地获得目的基因的cDNA片段,进一步证实了改良的CTAB-酸酚法是一种高质量提取微藻总RNA的有效方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔健		44	852	15.0	28.0
2	张可炜		28	607	13.0	24.0
3	杨婧		4	3	1.0	1.0
4	牛艳		2	3	1.0	1.0