Polo样激酶3针对P73蛋白的磷酸化位点分析

• 作者: 丁春艳 刘丽华 单保恩 孟君 桑梅香
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: polo样激酶3(Plk3) P73 磷酸化 位点 凋亡 宫颈癌细胞
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 280-284
• 分类号: R730.2|Q573
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2010.03.007

摘要

目的:探讨P73蛋白上存在的能够被polo样激酶3(polo-like kinases 3,Plk3)磷酸化的结构域或位点,并分析Plk3对P73介导肿瘤细胞凋亡的影响.方法:免疫共沉淀法检测COS-7细胞中Plk3与P73蛋白之间的相互作用,荧光免疫染色法检测Plk3与P73蛋白在细胞中的定位.制备不同的P73缺失突变体GST融合蛋白,体外点突变法构建GST-P73(1～130)点突变的P73(T86A)(第86位苏氨酸点突变为丙氨酸)质粒,体外磷酸化实验分析P73中被Plk3磷酸化的结构域或位点.通过检测PARP蛋白的裂解分析Plk3对P73介导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响.结果:Plk3与P73蛋白之间存在相互作用,Plk3与P73蛋白共定位于COS-7细胞核中.制备获得不同的P73缺失突变体GST融合蛋白,Plk3在P73蛋白N端第63～113位氨基酸残基之间磷酸化P73蛋白.GST-P73(1～130)融合蛋白第86位苏氨酸点突变为丙氨酸(T86A)之后,不影响GST-P73(1～130)蛋白的磷酸化状态.Plk3可抑制P73介导的HeLa细胞凋亡.结论:Plk3通过与P73蛋白结合,诱导P73蛋白N端第63～113位氨基酸磷酸化,但第86位苏氨酸并非Plk3的特异作用位点;此外Plk3抑制P73介导的HeLa细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘丽华		3	35	2.0	3.0
2	丁春艳		1	1	1.0	1.0
3	孟君		1	1	1.0	1.0