清道夫受体SR-PSOX基因定点突变的研究

• 作者: 刘威威 尹岚 张琪敏 戴亚蕾 陈春霞
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 清道夫受体 SR-PSOX 定点突变 转染
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 8-13
• 分类号: R363.2
• 字数: 4580字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0392.2010.02.003

摘要

目的 构建清道夫受体SR-PSOX点突变体,揭示该受体与脂质结合的关键位点,为确定SR-PSOX在脂质摄取、泡沫细胞形成中的作用提供模型.方法 利用分子克隆及PCR定点突变技术,构建不同突变点的片段并克隆到pEGFP-N3中,形成含有SR-PSOX各联合突变的pEGFP-SR-PSOX突变体质粒.转染293T细胞后采用流式检测受体表达情况.结果 从THP-1源性的巨噬细胞中成功克隆SR-PSOX受体并在真核表达载体pEGFP-SR-PSOX基础上获得了SR-PSOX三种突变体(R78、R82H85、R78R82H85).测序结果表明SR-PSOX序列中发生了预期的突变,使SR-PSOX受体中第78位精氨酸单点突变,第82位精氨酸、第85位组氨酸双点突变,第78、82位精氨酸和第85位组氨酸三点突变,均突变为丙氨酸.并将所有pEGFP-SR-PSOX突变体在293T细胞膜表面成功表达.结论 定点突变PCR可以成功构建SR-PSOX受体的3种突变体,使之在293T细胞表面获得表达,为进一步研究SR-PSOX的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	戴亚蕾	同济大学医学院免疫学教研室	20	121	6.0	10.0
2	张琪敏	同济大学医学院免疫学教研室	7	8	2.0	2.0
3	陈春霞	同济大学医学院免疫学教研室	9	10	2.0	2.0
4	尹岚	同济大学医学院免疫学教研室	7	14	2.0	2.0
5	刘威威	同济大学医学院免疫学教研室	3	5	1.0	2.0