RNA干扰沉默增殖诱导配体基因对结肠癌细胞周期的影响

• 作者: 丁伟峰 丛辉 倪红兵 景蓉蓉 王峰 王惠民 王敬春 王跃国 鞠少卿
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 增殖诱导配体 小干扰RNA 结肠癌 细胞增殖 细胞周期
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 795-799
• 分类号: R73
• 字数: 4009字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2010.09.003

摘要

目的 探讨沉默增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)基因对人结肠癌SW480细胞增殖及细胞周期的影响.方法 将APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(siRNA-APRIL)转染结肠癌SW480细胞株,以非特异性序列载体转染组(nontargeting control)及未转染组(nontransfected control)作为对照.Real-time PCR和Western blot评价APRIL沉默效率;CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化;RT-PCR检测细胞周期调控基因p21及p27的表达.结果 与非特异性序列载体转染组及未转染组相比,siRNA-APRIL显著抑制APRIL mRNA及蛋白的表达(P＜0.05);siRNA-APRIL转染SW480细胞48 h、72 h和96 h后细胞增殖能力明显下降(P＜0.05);转染48 h,siRNA-APRIL组G0/G1期细胞比例增高,S期及G2/M期细胞比例减少,细胞凋亡的数量增加,同时p21及p27 mRNA的表达上调(P＜0.05);而上述指标两对照组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 siRNA-APRIL能特异性抑制结肠癌SW480细胞APRIL的表达,并抑制细胞增殖,使细胞周期出现G0/G1期阻滞,其机制可能与上调p21和p27的表达有关.