乳铁素的融合表达及其体外抗菌活性鉴定

• 作者: 徐旭东 金茜 陈紫娟
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 乳铁素Lf-cinB intein融合表达 抗菌活性
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 478-481
• 页数: 4页
• 分类号: Q51
• 语种: 中文

摘要

为降低乳铁素Lf-cinB表达时对宿主细胞的毒害,提高乳铁索的表达量及纯化效果,合成了牛乳铁蛋白肽基因,克隆至E.coli表达载体pTYBll中,构建了与蛋白质内含子(intein)的C端融合的表达载体pTYBll-cinB.重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,融合蛋白intein-cinB主要以可溶形式存在于胞内.利用载体中intein中的chitin结合域,将融合蛋白通过chitin亲和层析一步纯化,经ETT诱导intein的自我切割活性,实现Lf-cinB在亲和柱上的切割与分离,透析冻干后得到了纯度94%的重组Lf-cinB.活性检测结果显示,重组Lf-cinB对多种检测菌均有抗菌活性.研究认为,内含肽在抗菌肽的基因工程中具有重要的应用前景.