HPLC法测定人肝微粒体6β-羟基睾酮和1-羟基咪达唑仑浓度

• 作者: 孙建国 张荣 王广基 蒋健 裘福荣 马越鸣
• 来源期刊: 中国临床药学杂志
• 关键词: 人肝微粒体 6β-羟基睾酮 1-羟基咪达唑仑 高效液相色谱
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 145-148
• 页数: 4页
• 语种: 中文

摘要

目的 建立和验证人肝微粒体中CYP3A4探药代谢物6β-羟基睾酮和1-羟基咪达唑仑的测定方法,以准确体外评价CYP3A4的活性.方法 在人肝微粒体温孵系统中加入睾酮37℃温孵生成6β-羟基睾酮,经过碱化后用乙酸乙酯提取微粒体样本,采用Phenomenex Gemina C18分离,流动相由甲醇和水组成,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长245 nm,测定微粒体中6β-羟基睾酮浓度;或人肝微粒体温孵系统中加入咪达唑仑,37℃温孵生成1-羟基咪达唑仑,经过乙腈处理人肝微粒体样本,采用Diamosil C18分离,20 mmoL·L-1醋酸铵-乙腈(60:40,V/V)流动相等度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm,测定1-羟基咪达唑仑浓度.结果 6β-羟基睾酮线性范围为0.111～8.90 mg·L～1,1-羟基咪达唑仑线性范围为20～1 000mg·L-1,两代谢物的批内、批间差异<15%,准确度为85%～115%.结论 建立的测定微粒体中6β-羟基睾酮和1-羟基咪达唑仑浓度的方法符合生物样品测定的要求,能准确测定微粒体中目标物浓度,可用于评价CYp3A4的活性.