鸡传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中的表达及其免疫学原性分析

• 作者: 亓丽红 刘涛 宋敏训 秦卓明 艾武 黄兵
• 来源期刊: 浙江农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性支气管炎病毒 S1基因 毕赤酵母 表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 585-589
• 分类号: S858.31
• 字数: 3880字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1524.2010.05.008

摘要

根据对山东IBV流行株的遗传变异分析,选取流行代表株LC2,扩增其S1基因,将其S1基因克隆到pPIC9K载体中,构建了真核表达质粒pPIC9K-S1,经SacⅠ线性化后,通过电转化到毕赤酵母GS115中,经MD/MM及G418筛选,PCR鉴定,获得多拷贝阳性重组菌pPIC9K-S1-GS115.将重组菌在0.5%甲醇中进行诱导分泌表达,对表达产物进行SDS-PAGE,Western blot分析.结果显示,在酵母培养基上清中检测到分子量为90 ku为目的蛋白,与鸡IBV阳性血清发生特异性反应.将表达上清及其重组菌菌体饲喂SPF鸡,40 d后采血,可检测到IBV保护性抗体.结果表明:表达的IBV的S1蛋白具有很好的免疫原性,为ELISA诊断试剂盒的研制及IBV疫苗的研制奠定基础.