红色糖多孢菌A226-ΔeryCⅢ突变体的构建及产物分析

• 作者: 张部昌 曹诚 许晓娟 赵玮 郭金华 陈惠鹏 黄训端
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 红色糖多孢菌 糖基转移酶 同源重组 红霉素
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 247-250
• 分类号: R978.1
• 字数: 3723字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2010.03.013

摘要

目的 构建红色糖多孢菌糖基转移酶EryCⅢ失活突变体,为探索红霉素糖基结构修饰和合成新型红霉素衍生物打下基础.方法 通过PCR扩增方法将eryCⅢ基因缺失130 bp后,克隆至同源重组型质粒pWHM3上,构建pWHM3-ΔeryCⅢ,将其导入红色糖多孢菌A226中.经过两次同源重组,筛选出1株缺失EryCⅢ酶活性的红色糖多孢菌A226-ΔeryCⅢ突变体.使用抑菌实验、薄层层析和质谱对其发酵产物进行分析,并通过回补实验进一步验证.结果 与结论 对红色糖多孢菌A226-ΔeryCⅢ染色体序列测定表明,eryCⅢ基因相应位点缺失130 bp,突变菌株发酵产物对枯草芽孢杆菌无抑制作用,薄层和质谱结果表明突变菌株积累3-L-mycarose 红霉内酯B(MEB),而并没有发现红霉素产物.回补验证发现eryCⅢ基因导入A226-ΔeryCⅢ使得其恢复了红霉素合成能力.所构建的红色糖多孢菌EryCⅢ失活突变体A226-ΔeryCⅢ,为探讨组合合成红霉素衍生物奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈惠鹏	军事医学科学院生物工程研究所	143	885	15.0	23.0
2	黄训端	安徽大学生命科学学院安徽省生态工程与生物技术重点实验室	58	513	12.0	21.0
3	郭金华		3	9	1.0	3.0
4	曹诚	军事医学科学院生物工程研究所	112	536	10.0	19.0
5	许晓娟	安徽大学生命科学学院安徽省生态工程与生物技术重点实验室	3	1	1.0	1.0
6	赵玮	安徽大学生命科学学院安徽省生态工程与生物技术重点实验室	3	6	1.0	2.0