层出镰刀菌T-DNA插入突变体库的构建与分析

• 作者: 刘丽媛 刘力伟 曹克强 朱立华 王亚南 王树桐 胡同乐
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 层出镰刀菌 农杆菌介导转化(ATMT) 苹果再植病害 突变体
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 页码范围: 71-75
• 页数: 5页
• 分类号: S432.4+4
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2017.0013

摘要

苹果再植病害(Apple replant disease,ARD)是世界苹果主产区广泛发生的病害.前期研究表明,层出镰刀菌是造成苹果再植病害的重要致病菌之一,但其分子致病机制尚缺乏研究报道.本研究的目的是建立农杆菌介导的层出镰刀菌的遗传转化体系,并获得大规模的遗传稳定的层出镰刀菌ATMT突变体库,为研究该菌的分子致病机理奠定基础.对影响农杆菌介导转化效率的主要因子进行单因子条件测验,得到其最优转化体系为:抑制H10菌丝和孢子生长的潮霉素的浓度为100 μg/mL,层出镰刀菌的分生孢子浓度为107个/mL,农杆菌OD600值为0.3,AS浓度为200 μg/mL,共培养时间为48 h,共培养温度为26℃.利用这一体系构建了3000个转化子的突变体库,并对随机选择的200个突变体进行潮霉素抗性基因的PCR检测,并经过在PDA培养基上5代培养,验证了T-DNA插入片段的稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹克强	河北农业大学植物保护学院	192	2819	27.0	44.0
2	胡同乐	河北农业大学植物保护学院	80	1199	20.0	31.0
3	王树桐	河北农业大学植物保护学院	90	983	17.0	26.0
4	王亚南	河北农业大学植物保护学院	52	489	12.0	19.0
5	刘丽媛	河北农业大学植物保护学院	10	51	5.0	7.0
6	刘力伟	河北农业大学植物保护学院	5	23	2.0	4.0
7	朱立华	河北农业大学植物保护学院	1	1	1.0	1.0