高效小鼠CD40siRNA基因片段的筛选及对淋巴细胞CD40基因表达的影响

• 作者: 严金川 徐良洁 杨萍 王标 龚杰
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 小分子RNA干扰 淋巴细胞 CD40 反向转染
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 476-480
• 分类号: R329
• 字数: 3639字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2010.06.005

摘要

目的: 应用RNA干扰技术筛选高效小鼠CD40siRNA基因序列片段.方法: 体外化学合成小鼠CD40基因为靶标的siRNA 3对(siCD40-1、siCD40-2、siCD40-3),通过脂质体瞬时转染小鼠脾淋巴细胞(实验组),并分别以转染无关siRNA片段及未转染细胞作为对照(对照组).分别采用流式细胞术、实时荧光定量PCR检测转染24 h细胞表面CD40抗原、CD40 mRNA表达,蛋白质印迹检测转染48 h蛋白表达的变化.结果: 与对照组相比,实验组CD40抗原表达、CD40 mRNA及蛋白表达明显下降(P<0.01);3对实验组siRNA能明显抑制CD40基因表达,抑制率分别为69%、78%和41%,差异有统计学意义(P< 0.05).而各对照组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论: siRNA可抑制小鼠淋巴细胞表达CD40,并具有良好的特异性,其中siRNA-2为最高效干扰片段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严金川	江苏大学附属医院心血管内科	183	717	13.0	17.0
2	徐良洁	江苏大学附属医院心血管内科	26	151	6.0	11.0
3	王标	江苏大学附属医院心血管内科	8	22	4.0	4.0
4	龚杰	江苏大学附属医院心血管内科	6	13	2.0	3.0
5	杨萍	江苏大学附属医院心血管内科	18	44	4.0	6.0